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奈瑟氏菌科l Neissriaceae)
奈瑟氏菌属(Neisseria)和莫拉氏菌属()隶属该科,除脑膜炎奈瑟氏菌、淋病奈瑟氏菌和卡他布兰汉菌外,多为腐生菌,常寄居于正常人鼻咽部、胃肠道及泌尿生殖道。
脑膜炎奈瑟菌(Neisseria meningitidis)
脑膜炎奈瑟菌通常寄居于宿主的鼻咽腔内和口腔黏膜上,通过呼吸道分泌物或空气微滴核传播。它是流行性脑脊髓膜炎的病原体,多为隐性感染,当宿主抵抗力降低时,先引起呼吸道感染,细菌进入血液时导致菌血症,大量繁殖入侵淋巴结到达脑脊膜,即发生急性化脓性脑膜炎,发病高峰为冬末春初,感染者多为学龄儿童、青少年。治疗药物首选为青霉素。偶见通过性接触传播引起女性外生殖道感染。还可发生关节炎、化脓性眼结膜炎、心内膜炎和原发性肺炎。
1.涂片检查:取离心沉淀的脑脊液或瘀点穿刺渗出液、鼻咽部分泌物、拭子、浆膜腔穿刺液等涂片革兰染色,涂片在白细胞内外见到革兰阴性双球菌可作出初步报告。
2.凝集试验:用含有脑膜炎奈瑟菌多糖抗原A\\C\\Y\\W125血清型的多价抗体做直接凝集试验。检测结果应结合涂片和培养结果。抗原检测阳性结果可作出快速推断性诊断。
3.聚合酶链反应(PCR)检测:PCR检测敏感性高,对已服药治疗的患者尤其适合。但需一定的条件,技术要求较高,否则易影响结果的准确性,导致假阳性或假阴性结果。只有取得相应资质认可的实验室才能开展此项检查。
4.培养鉴定:营养要求高,必须在含有血液、血清、腹水或多种氨基酸、无机盐等物质的培养基上生长。本菌初次分离时必须在含有5~10%二氧化碳环境中培养。最适生长温度为35℃,低于30℃不生长。常用培养基有:巧克力琼脂平板、血琼脂平板和卵黄双抗琼脂平板。本菌分解麦芽糖,可与淋球菌相鉴别。
淋病奈瑟菌(Neisseria gonorrhoeae)
淋病奈瑟菌(简称淋球菌)是常见的性传播疾病——淋病的病原菌,主要通过性接触直接侵袭感染泌尿生殖道、口咽部和肛门直肠的黏膜。淋病的临床类型可分为:
1.单纯淋病:大部分患者表现为本型。男性感染后7d内发生急性尿道炎,表现为尿频、尿急、尿痛,尿道口有脓性分泌物,不及时治疗可继发附睾炎、前列腺炎和尿道狭窄。妇女的原发部位是子宫颈内膜,表现为子宫颈红肿、**分泌物增多和排尿困难。在女性单纯淋病患者中,无症状和轻微症状患者较多,故易忽略,不能及时就医而继发合并症,以及成为传染源而继续感染他人。
2.盆腔炎性疾病:单纯淋病女性患者不及时治疗可发生盆腔 炎性疾病。本病是造成女性生殖系统损害的严重合并症,表现为子宫颈内膜炎、输卵管炎、盆腔炎和输卵管脓肿等。
3.口咽部和肛门直肠淋病:前者表现为轻度咽炎,后者表现为里急后重、局部灼痛和脓血便。
4.结膜炎:多见于新生儿,因分娩时接触患淋病产妇的产道分泌物所致,不及时治疗可导致失明。
5.播散性淋病:1%~3%的淋病患者可发展为播散性淋病,尤其见于补体功能缺陷的患者,表现为畏寒、发热、皮肤病变和多关节肿痛,少数患者可发生化脓性关节炎和脑膜炎。
淋病的实验室检测主要有分泌物的涂片检查、淋病奈瑟菌的分离培养及药敏试验、淋球菌β-内酰胺酶测定等。
1.分泌物的涂片检测
(1)男性患者:急性患者的分泌物涂片检查到多形核白细胞内革兰阴性双球菌即可诊断。病期较长的患者涂片见到的菌体常在细胞外,此时需结合病史,必要时做淋球菌培养。另外,如涂片时涂擦过劲,也会使细胞破裂或变形,细菌从细胞内逸出,从而造成诊断上的混淆,故需引起注意。
(2)女性患者:官颈分泌物中如找到典型的细胞内革兰阴性双球菌,结合病史(不洁**史),可报告涂片查到革兰阴性双球菌并确定诊断。由于女性官颈和**中杂菌较多,有的杂菌单纯从形态上很难与淋球菌区分,所以,如果女性患者症状轻或无症状时,单靠涂片结果难以做出明确诊断,需做淋球菌培养等检查。
(3)不推荐用涂片检查来诊断淋球菌性直肠和咽部感染,也不推荐用来判断预后。
2.淋球菌分离培养
(1)分离培养是目前世界卫生组织推荐的筛查淋病患者的唯一方法。主要用于某些临床症状疑似淋病但涂片检查阴性的患者,或症状不典型而涂片中有些细菌像淋球菌的患者作进一步诊断。
有时为了某些特殊的目的,如做淋球菌药物敏感性试验等也需要做淋球菌培养。另外,淋球菌的培养对无症状或症状很轻的女性患者或男性患者都很敏感,是确诊的可靠方法。
(2)分离培养阳性可以确诊淋病。但一次培养阴性不能完全排除淋病,还要考虑取材的部位和方法是否准确。对淋球菌培养阴性,病史和体征怀疑为淋病的也可作PCR检测淋球菌DNA以协助诊断。淋病经治疗后,症状和体征全部消失,治疗结束后4~7d取材培养和涂片检查,均为阴性,可判为痊愈。
3.淋病的聚合酶链反应(PCR)检测:PCR检测敏感性高,对已服药治疗的患者尤其适合。但需一定的条件,技术要求较高,否则易影响结果的准确性,导致假阳性或假阴性结果。只有取得相应资质认可的实验室才能开展此项检查。
4.目前,质粒介导对青霉素和四环素的耐药性在淋病奈瑟菌中已愈来愈多见。虽然大多数淋病奈瑟菌对大观霉素、第三代头孢菌素和氟喹诺酮类抗菌药物等很敏感,但对于本菌的临床分离株应强调做药敏试验,有助于临床合理用药。
卡他布兰汉菌(Branhatarrhalis)
以前认为卡他布兰汉菌不致病。近10年来报道卡他布兰汉菌是导致中耳炎、鼻窦炎、结膜炎、慢性阻塞性肺炎的病原体,甚至可引起心内膜炎、脑膜炎、败血症及女性前庭大腺脓肿等,因此被认为是一种具有相当临床意义的病原菌。
1.培养鉴定:卡他布兰汉菌感染诊断主要依据细菌培养结果。
本菌对营养无特殊要求,人工培养的菌体较大,不产色素,不易在盐水中乳化;触酶、氧化酶和DNA酶均阳性,可与类似菌相鉴别。
2.限制性核酸内切酶分析(REA):DNA酶切后通过凝胶电泳可获不同RIA图谱。
3.其他方法:脂多糖抗原、酯酶电泳等。